Miss Cheerilee est professeur des écoles à Ponyville. Elle est d'ailleurs l'enseignante de Sweetie Belle, Applebloom et Scootaloo. Gentille et attentionnée, Cheerilee est décrite comme une maîtresse très à l'écoute de ses élèves, ce que confirme d'ailleurs sa cutie mark, signifiant le désir de voir sourire ses étudiants. Elle est néanmoins assez stricte lorsque l'un de ses élèves dépasse les bornes, comme c'est le cas de Diamond Tiara, qui a abusé de la liberté donnée par l'institutrice.

Très ouverte, elle invite fréquemment des intervenants extérieurs à présenter leur travail ou des projets à la classe, comme c'est le cas lors de l'invitation de Granny Smith ou de Miss Harshwhinny. Il lui arrive également d'organiser des sorties éducatives, emmenant ses élèves visiter les jardins du château et leur présentant par exemple la statue de Discord.

Devant un tel modèle de gentillesse, il parait inconcevable aux Cutie Mark Crusaders que Cheerilee soit seule le jour de Hearts and Hoove Day, l'équivalent de notre Saint Valentin. Au plus grand désarroi de la ponette mauve, elles se mettent donc en tête de lui trouver l'étalon parfait, et finissent pas trouver Big Macintosh... Prétextant vouloir l'aide de leur professeur pour identifier un arbre (qui s'avère être un pommier...), les CMCs organisent donc un dîner en tête à tête entre Cheerilee et Big Macintosh ; et bien que leur première tentative fut un échec, les deux victimes finirent par boire le filtre d'amour préparé, pensant qu'il s'agissait d'un punch... Mais la boisson ne fut finalement ni l'un ni l'autre - ce fut un poison d'amour!

Big Macintosh et Cheerilee tombèrent maladivement amoureux l'un de l'autre, ne songeant plus au reste du monde, risquant ainsi de délaisser leurs travaux respectifs. Heureusement, les CMCs parvinrent à rattraper leur erreur, et Cheerilee leur délégua les corvées de Big Macintosh en tant que punition. Elle alla pendant ce temps faire un pique-nique avec le poney rouge, et imita ce qu'ils avaient été plus tôt pour effrayer les filles.

Il semblerait qu'elle soit restée proche de Big Macintosh, et continue de jouer de cette histoire, feignant de s'évanouir lors d'une prestation du fils Apple, par exemple.